“反相色谱柱”之谜
--许昌学院化学化工学院“吟科学,兴真理”探禹白芷镇痛活性成分之奥秘
实践队
今日,许昌学院“吟科学,兴真理”探禹白芷镇痛活性成分之奥秘暑期社会实践队的队员伴着清晨的朝阳来到了许昌学院化学化工学院的实验室,今天他们学习了反相色谱,并了解了它的基本原理。
首先是反相色谱的介质是固定相,是极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。反相色谱必须用极性有机溶剂(如甲醇、乙腈等)或其水溶液进行溶质的洗脱分离。
其次是溶质在反相介质上的分配系数,它取决于溶质的疏水性,一般疏水性越大,分配系数越大。当固定相一定时,可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。由于反相介质表面为强烈疏水性,并且流动相为低极性的有机溶剂,生物活性大分子在RPC分离过程中容易变性失活,所以,以回收生物活性蛋白质为目的时,应注意选用适宜的反相介质。
反相色谱最具代表性是以硅胶为载体,通过表面键合非极性分子层制备。通过控制反应时间和温度,可获得性能稳定的反相介质。在硅胶基质的反相填料中,以键合有C18球形多孔填料最为常见,用途最广。反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团,基于样品中的不同组分和疏水基团之间疏水作用的不同而分离。
希望了解了更多分离手段的他们可以有一个更好的成绩。
供稿人:张凌翔
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