分子量不同分离用凝胶
--许昌学院化学化工学院“吟科学,兴真理”探禹白芷镇痛活性成分之奥秘
实践队
许昌学院化学化工学院“吟科学,兴真理”探禹白芷镇痛活性成分之奥秘暑期社会实践队的队员们又开始了充满活力的一天,今天他们有了解了一种分离的手段-聚酰胺色谱柱。
首先,对于黄酮类和多酚类化合物, 因为其富含酚羟基, 可通过分子中的酚羟基与聚酰胺分子中的酰胺基形成氢键缔合产生吸附。吸附的强度主要取决于这两种化合物中羟基的数目与位置、以及溶剂与化合物或溶剂与聚酰胺之间形成氢键的缔合能力大小。溶剂分子与聚酰胺或黄酮类化合物形成氢键缔合的能力越强, 则聚酰胺对这两种化合物的吸附作用将越弱。聚酰胺层析柱即是利用此性质对各种植物中黄酮、茶多酚等进行吸附、洗脱而分离的, 即所谓的“氢键吸附”学说。
其次,聚酰胺分子中有极性酰胺基团和非极性的脂肪键。作为一个相对弱极性的化合物, 当移动相为极性强的溶剂(如水、乙醇、丙酮等)时, 聚酰胺作为非极性固定相, 其层析行为类似反相分配层析, 极性较大的吸附物易被洗脱。随着洗脱剂极性降低, 极性较小的化合物可相继被洗脱下来
最后是关于聚酰胺色谱柱的制备,若用含水溶剂系统层析,常以水装柱。在以非极性溶剂系统层析时,常以溶剂组份中极性低的组份装柱。若以氯仿装柱,因其比重较大,使聚酰胺粉浮在上面,加样时应将柱底端的氯仿层放出,并立即加样,加样后顶端以棉花塞紧,在层析关闭时,应将顶端的多余氯仿液放出,否则,聚酰胺会浮起而搅乱层析带。
供稿人:张凌翔
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