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山东大学公共卫生学院茯砖茶褐素对II型糖尿病社会实践的改善作用研究培训

来源:山东大学公共卫生学院 作者:茯砖茶褐素研究团

在2020年的暑假,我们开展了茯砖茶褐素对II型糖尿病社会实践的改善作用研究课题社会实践,对此进行研究前培训。主要存在以下几点培训项目。

小鼠饲养注意事项

1、饲料需用可高压灭菌的高压饲料。

2、检查饲料质量,如发现饲料有霉变、结块及有虫蛀的情况,不得使用。

3、将饲料装贮槽。

4、将清洁水或酸化水PH3.0酸化)装入饮水瓶中。

5、把饮水瓶装入饮水瓶柜。

6、贮槽和饮水瓶必须用消毒布袋封包,布袋一定要扎紧袋口,以尽可能与外界隔离为原则(如暴露空气时间较长,则需用2-3层布包裹,用脱皮法进入实验室)。

小鼠灌胃的方法及注意事项

小鼠灌胃方法比较简单,需要关注的只有两点:

一、要保持小鼠的头部和颈部成一直线,方便灌胃针头进入;

二、动作要轻柔,从口角进入,防止损失食道。做的多了自然就熟练了。

三、具体操作过程如下:

1、准备灌胃针头。一般可以从市场上面买到,实在没有的话,可以用12号的针头,剪去针尖,用砂纸将头端磨平,也可以用。但是买的灌胃针头的头端用锡或者适宜的方法处理了针头的锐口,自己用砂纸不可能将所有的锐口都磨掉,用这样的针头灌胃,损失小鼠食道的可能性比较大。

2、抓住小鼠,使其头、颈和身体呈一直线。抓小鼠的动作很简单,左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴,另外三个手指抓住小鼠的颈部即可。因为小鼠始终在活动中,若一次抓的感觉不是很顺手,要放开重新抓,不要逞强进行下一步操作。

3、抓好小鼠就可以灌胃了,一般用1ml的注射器配灌胃针头。灌胃针头从小鼠的嘴角进入,压住舌头,抵住上颚,轻轻向内推进,进入食管后会有一个刺空感,进入食道后就可以推注药液了。(我认为,所谓的灌胃,不必要灌胃针头进入小鼠的胃部,进入食管后就可以推药了,这样对小鼠食道的损伤要小点,特别是要长期灌胃给药的情况下。)当然,灌胃针头也可以再往里面深入一点,防止药液从口中流出。

4、灌胃容积一般是~10g,最大10g,每只小鼠的灌胃最大容积不超过。

SPF级动物实验室操作规程细则

一、实验人员须知

1、进行动物实验,应事先与动物实验室联系,填写《动物实验申请表》,经批准后方可进行。

2、开始实验,请提前20分钟运行空调机组和紫外灯杀菌,开空调机组顺序是:开排风机开空调循环风机开空调冷热源机组实验中所需的器械、物品均需严格消毒后方可带入实验室。

3、实验人员进入动物实验室,需按照实验室规定的程序进入。、操作时,手不可直接接触动物和消毒灭菌过的物品。操作前必须戴上灭菌过的、完好的乳胶手套或消毒过的浸塑手套。操作中手套不能接触层流架外未经消毒的物品。

4、操作时,层流架和超净工作台风机电压调至非操作时的静态风机工作电压调至70V。层流架各笼位的密封窗不要多扇同时开,并应随时关闭。操作顺序:从左到右,从上到下。必须将动物饲育盒边过滤帽迅速移到超净工作台内,然后打开过滤帽进行操作。

5、开实验室时,立即关闭空调机组,关机顺序是:关空调冷热源机组关空调循环风机关排风机。最后将紫外灯打开杀菌消毒。

6、实验者原则上应每天进入动物实验室观察,如发现有动物异常应及时处理。

7、非实验人员不得擅自进入动物实验室。

8、实验后,不必要的仪器、物品、样本或死亡的动物,应在离开实验室时带出。

9、实验者不得动用非本课题动物,一旦发现将严肃处理。

10、实验者不得擅自搬动动物实验室的设备,如有损坏者,按价赔偿。

11、实验全部结束,实验者应立即通知动物实验室管理人员,以便及时清理、消毒并做好迎接新课题的一切准备工作。

二、层流架操作规程

1、在正常运转时,将层流架的电压表调至70V,在开层流架门时将电压表调至150V,所有的门关闭后将电压表调回至70V。

2、左手开门,右手取层流架中的鼠盒,取出鼠盒后及时将门关上,以免空气倒流进层流架。取鼠盒时,连同鼠盒上的过滤帽一同取出,迅速移至超净工作台内(或该层流架的操作层)。

3、过滤帽只能在超净工作台中打开,进行实验操作。

4、超净工作台内的实验完毕,即在该工作台盖上过滤帽移回原层流架,随即关闭层流架门。

5、在第一次放入鼠盒之前,需用消毒液将层流架的四壁擦净,然后才能放入鼠盒。

6、对于大批层流架的鼠盒取出,原则上是至上而下,从左到右依次进行。

7、取动物的摄子需备数把,均浸泡在消毒液中,轮流使用。

8、实验操作完毕,需打开紫外灯作一定量时间的照射消毒。

9、实验人员进行操作时,需戴一次性灭菌手套。

三、实验室的例行清洁卫生和例行消毒规定

1、实验室内环境符合清洁级动物实验室级别的要求,外环境整洁。

2、实验结束后对相应的实验设施作一次清洁消毒,再次实验前作一次加强消毒。

3、常用消毒剂应每周更换,以保证其消毒性能。

4、消毒前后物品应严格分开保存。

5、每隔一定时间更换消毒剂品种,以防抗药性。

有关于茶褐素的提取

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