柱层析分离
2021年6月28日下午三点,我们实验室的成员在老师的指导下进行过柱子——柱层析分离,让我们实验室成员了解了有机实验的常用基础操作过柱子。
实验前老师先向大家简单讲述了关于过柱子的一些常识,过柱子就是柱层析分离,在我们实验室常用的是以硅胶作固定相的吸附柱。再由老师带我们体验了三种不同的柱子,有加压柱,减压柱和常压柱,然后老师带我们都体验了一遍,并且向我们讲述了三种柱子的区别,首先是压力柱,压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,其他条件相同的时候,然后是常压柱,常压柱是效率最高的,我们常用的是加压,加压柱与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗剂走的快些,也要注意压力不可过大,不然溶剂走的太快就会减低分离效果,除了这两种还有减压柱,减压柱能够减少硅胶的使用量。节省时间,但由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发,有些比较易分解的东西可能得不到。通过老师向我们讲述这三种的区别,我们觉得加压柱在有机化合物的分离中比较适用。最后老师向我们介绍了过柱子的流程,让我们自己做的时候注意按照流程进行。需要按比例称取硅胶,将硅胶放入烧杯中,然后添加一些溶剂,使用玻璃棒搅成匀浆。将柱底用棉花塞紧,加入氯仿,装上蓄液球,打开柱底下的活塞,将匀浆倒进球内,用氯仿冲入,使用气泵将其加压,压实为止。第三步需要上样,干湿皆可以。上样后加入洗脱剂,再将脱脂棉塞到硅胶表面。过柱完之后进行收集。第四步就是检测,检测的时候要多次使用喷显剂。检测完之后,就是送谱,将收集的产品旋干,不过一般送谱的时候都需要重结晶,已达纯化手段。
通过这次实验让我们实验室成员明白了三种柱子中加压柱更适合有机化合物的分离,而且知道了详细过柱子的实验流程,也希望通过这次实验大家能够加深对过柱子这一常用操作的认识和了解,充分把它用好在每一次有机实验中。
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