“柱层析”到底有多“折磨人”(二)
——许昌学院“探化学之美,品合成之魅”社会实践队
六月三十日,许昌学院“探化学之美,品合成之魅”实践队实践第三天。今天,有部分实践队员继续使用柱层析法对样品进行分离纯化。
过柱子不仅仅装柱子难,接下来的上样和过柱才是重头戏!
“上样难”——上样有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层析柱内壁均匀加入。然后用少量溶剂洗涤后,再加入。湿法较方便,熟手一般采用此法。
“过柱难”—— 上样完毕后,接着即用淋洗剂淋洗。淋洗剂一般采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。由于层析柱和薄板的不同,即使两者使用的硅胶都相同,但是在把TLC分析得到的展开剂用在柱层析时,也显得极性偏大,所以要稀释一倍,但又不能稀释太多,否则成了靠扩散作用来分离,效果也不会好。
过柱子首先需要控制硅胶高度,其次需要控制上样量及速率,最后需要控制淋洗剂的比例。这个过程是极其的消耗时间,而且这其中任何一个环节除了差错,都将宣告此次过柱的失败。而这每一个控制都需要过柱前充分的准备工作以及大量的经验!所以,“过柱难,难于上青天啊”。但倘若你充分掌握了这一项技能,你的实验技能将得到质的飞跃!为此,实践队每一位成员都将充分努力!!
供稿人:付晨雨
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