分离提纯 纯化优化

今天是社会实践的第五天，我们分子荧光探针社会实践队开始进入最为关键性的阶段，今天的主要任务是对所得到的粗产品进行分离提纯。

在进行实验之前，我们小组查阅了文献进一步了解了硅胶柱层析的原理，只有对原理有深刻的了解，才能进一步使实验高效率的完成。根据物质在硅胶上的吸附力的不同而得到分离，极性较大的物质与硅胶作用强，保留时间长，极性弱的物质与硅胶作用弱，保留时间短，物质在固定相与流动相间通过反复的吸附、解吸过程，得以分离。根据以上原理，我们采用展开剂正己烷与二氯甲烷3:1的比例进行梯度洗脱。在这一过程值得我们注意的是，在进行装柱时，硅胶通过漏斗装入柱内，中间不应间断，形成一股细流慢慢加入管内。也可用橡皮槌轻轻敲打柱硅胶柱使硅胶装填连续均匀、紧密。柱装好后，打开下端活塞，然后倒入洗脱剂洗脱以排尽柱内空气，使柱内不含有气泡，这样会使分离提纯造成影响，其次就是进行上样、梯度洗脱，收集洗脱液，整体的操作流程比较简单。

在操作过程中，团队的配合能力是非常重要的作用，因此，比较考验我们队员的默契能力。值得庆幸的是，我们小组的配合非常成功，以至于今天实验操作圆满完成。同时，在进行实验操作时，需要我们每一位队员都能够做到多动脑，多思考，勤于动手，多多操作练习。

（供稿人：徐路洋）

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